ErbB2是表皮生长因子受体家族的重要成员，作为一种受体酪氨酸激酶，在细胞增殖、分化、迁移及存活等生理过程中发挥核心调控作用。
ErbB2是表皮生长因子受体家族的重要成员，作为一种受体酪氨酸激酶，在细胞增殖、分化、迁移及存活等生理过程中发挥核心调控作用。该受体的异常活化与多种实体瘤的发生发展密切相关，尤其是在乳腺癌、胃癌及胆囊癌等多种恶性肿瘤中，ErbB2基因扩增或蛋白过表达是重要的驱动因素。基于其明确的促瘤功能，针对ErbB2的单克隆抗体药物已在临床上得到广泛应用，显著改善了相关肿瘤患者的预后。然而，原发性或获得性耐药问题日益突出，成为限制ErbB2靶向治疗效果的主要挑战。
传统短读长测序技术在解析复杂转录本结构方面存在局限性，而长读长测序技术的应用为全面揭示转录组复杂性提供了新视角。近期研究通过对胆囊癌组织及细胞系进行系统的全长转录组测序分析，构建了高质量的胆囊癌转录组图谱。该研究不仅验证了已知ErbB2转录本的表达模式，更重要的是发现了一种新型的剪接变异体——ERBB2 i14e。该变异体在第14内含子区域插入了长度为102个碱基对的新外显子，编码34个氨基酸的额外肽段，位于ErbB2蛋白的胞外Ⅳ结构域。生物信息学分析和实验验证表明，这种新型变异体在约25.5%的胆囊癌样本中表达，且与患者不良预后显著相关。
深入的功能机制研究发现，ERBB2 i14e变异体具有独特的生物学特性。该变异体编码的额外肽段显著增强了ErbB2与ErbB3受体的相互作用能力。在神经调节蛋白1存在的情况下，ErbB2 i14e与ErbB3形成的异二聚体表现出更强的稳定性，导致下游PI3K/AKT信号通路持续激活。体外细胞功能实验证实，表达ErbB2 i14e的肿瘤细胞增殖能力显著增强，肿瘤形成潜力明显提高。这些发现揭示了转录本水平变异如何通过改变蛋白质相互作用界面，最终影响信号传导效率和肿瘤生物学行为。
研究表明，ErbB2 i14e变异体介导了针对ErbB2的单克隆抗体药物的耐药性。结构分析显示，该变异体编码的额外肽段位于ErbB2胞外结构域的关键区域，恰好形成了空间位阻效应。这种构象变化导致治疗性抗体无法有效识别和结合ErbB2 i14e的抗原表位，从而丧失了原本的中和或内化清除功能。分子动力学模拟进一步证实，额外肽段诱导的构象变化显著降低了抗体与受体的结合亲和力。这种由转录本变异引起的靶点构象改变，代表了肿瘤耐药的一种新型机制，不同于传统的基因突变或信号通路代偿性激活。
1.变异体检测：开发针对ErbB2 i14e独特表位的抗体，可在蛋白质水平直接检测该变异体的表达情况。
2.功能状态分析：通过磷酸化特异性抗体，研究不同ErbB2变异体下游信号通路的激活状态差异。
3.药物结合评估：利用竞争性结合实验，评估治疗性抗体与不同ErbB2变异体的结合能力。
4.临床样本验证：在肿瘤组织样本中进行多参数分析，建立ErbB2变异体表达与临床预后的相关性。
5.治疗反应监测：动态监测治疗过程中ErbB2变异体表达水平的变化，指导个体化治疗方案调整。
针对ErbB2 i14e介导的耐药机制，研究者提出了多种创新性治疗策略：
1.剪接调控干预：研究发现剪接因子ESRP1/2参与调控ERBB2 i14e的产生。设计靶向该剪接过程的反义寡核苷酸，可特异性抑制ErbB2 i14e的表达，同时不影响野生型ErbB2的功能。
2.新型抗体开发：针对ErbB2 i14e的独特表位设计新一代治疗性抗体，克服空间位阻效应，恢复对变异体的靶向能力。
3.多靶点联合策略：将ErbB2抗体与AKT信号通路抑制剂联合使用，同时阻断上游受体激活和下游信号传导。
4.抗体偶联药物优化：开发能够识别ErbB2 i14e的抗体药物偶联物，利用其内化特性递送细胞毒性药物。
5.免疫治疗联合：探索ErbB2抗体与免疫检查点抑制剂的协同作用，激活抗肿瘤免疫应答。
1.全面变异体鉴定：利用长读长测序等技术，系统鉴定ErbB2在不同肿瘤类型中的转录本变异体谱系。
2.结构功能解析：通过结构生物学方法，详细阐明不同变异体的三维构象特征及其与抗体相互作用的分子基础。
3.动态监测技术：开发基于液体活检的ErbB2变异体监测技术，实现耐药性的早期预警。
4.精准治疗策略：建立基于ErbB2变异体表达模式的个体化治疗决策系统。
5.新型抗体工程：利用人工智能辅助的抗体设计平台，开发能够识别多种ErbB2变异体的广谱治疗性抗体。
2019-01-21
